pUC-T TA載體是一種克隆PCR產(chǎn)物的載體，它是由pUC18載體在EcoR V
酶切位點處切開，在兩側(cè)的3′端添加T而成。由于大部分耐熱聚合酶反應時都會在 PCR
產(chǎn)物的3′端添加一個A，它可以與pUC-T 3′端的T互補連接，因此可大大提高PCR產(chǎn)物的
連接和克隆效率。
試劑盒中配備率的T4 DNA Ligase和為快速DNA連接優(yōu)化的2×Quick Ligation
Reaction Buffer。連接效率相當于用T4 DNA Ligase 進行常規(guī)連接1小時。帶有插入片
段的重組子可根據(jù)α互補原理，進行藍白斑篩選，判斷載體中有無外源基因的插入。克
隆后可以用BcaBEST Sequencing Primers和 M13通用引物對PCR產(chǎn)物進行測序。
|
